聯(lián)系電話：
18502669006
服務(wù)熱線： 15502280048
服務(wù)熱線： 
ELISA實驗稀釋血清具體步驟
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個參數(shù))，將抗原進行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進行孵育后洗滌，再加酶結(jié)合物進行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后，加底物溶液顯色，終止反應(yīng)后分別測定o.d值，選擇o.d值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個o.d值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清o.d值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的o.d值有明顯差別。
在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋?有兩個原因：
1.競爭抑制比較明顯，應(yīng)稀釋競爭物;
2.血清中含有的性腺激素比較低，應(yīng)該濃縮才對。
ELISA試劑盒血清標(biāo)本的保存建議有以下幾點：
1.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染，一則細菌的生長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
2.血清標(biāo)本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，ELISA如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下。
3.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意，不要進行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可。
4.要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
5.標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
針對以上技術(shù)資訊內(nèi)容，如果您有不太清楚或者了解更多信息(包括基本信息/技術(shù)資料/解決方案)，都可以隨時我司業(yè)務(wù)員。另外力于提供生命科學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)服務(wù)，提供實驗技術(shù)服務(wù)，為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復(fù)勞動的時間和精力，我們有過硬的技術(shù)咨詢和完善的售后服務(wù)，為您解決后顧之憂。
本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。
技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
